Италия, 1476 год. Отца и двух братьев флорентийца Эцио казнят по ложному обвинению на центральной площади города. Эцио встает на путь мести всех, кто причастен к гибели родственников. В игре исправили очень многое из того, что так раздражало в первой части: путешествовать стало проще, система боя улучшилась, добавилось больше возможностей в игре.